Caracterização de viroses, viroídes e fitoplasmas- Emprega-se várias técnicas de biologia
molecular  para  análise  de  proteínas  e  ácidos  nucleicos  como  PCR,  clonagem  de  genes,
sequenciamento genético, expressão de proteínas em sistemas eucariotos e procariotos. Esta
linha visa principalmente a elucidação do genoma viral através da identificação dos  genes  e
proteínas estruturais  e  não  estruturais,  e  da  organização  e  expressão  do genoma  destes
patógenos.   Estes   estudos   permitem   a   determinação   da   posição    taxonômica    destes
organismos, bem como se determinar a variabilidade genética deste fitopatógenos  no  Brasil.
Visa também a expressão de proteína em vetores  apropriados  para  obtenção  de  antissoros
específicos  que  permitem  estudos  de  função   proteica   e   implicação   ultraestrutural   via
imunomarcação e  microscopia  eletrônica.  Atualmente  estamos  caracterizando  espécies de
tospovírus, geminivirus, complexo de viroses do alho, complexo do  mosaico  do  milho e  um
novo vírus que afeta mamoeiro. Temos também  dados  sobre  a  variabilidade de  fitoplasmas
em diversas espécies de plantas.

        Produção   de   Kits - Através   do   estudo   de   proteínas   e   ácidos   nucleicos   destes
fitopatógenos visamos a produção  de  kits  diagnósticos  sorológicos  e  moleculares  (como
sondas e primers específicos e universais em PCR). Esta área  é  carente  no  Brasil  pois  para
vários vírus importantes ainda não se encontra disponíveis  material  nacional  para  este  fim.
Temos  disponibilizados  antissoros  específicos   para   espécies   de   tospovírus,   vírus   de
mamoeiro,  viroses  do  milho,  primers  e  sondas  para   tospovírus   e   geminivírus,   primers
universais e sondas específicas para viroses  do  alho,  primers  universais  para  fitoplasmas,
sondas para viroses do complexo mosaico do milho, sondas para a novo vírus do mamoeiro.

        Resistência genética - Além da integração em programas de melhoramento genético para
resistência  a  vírus,  principalmente  em  hortaliças,  nossa   linha   de   pesquisa   envolve   a
obtenção de resistência transgênica, através da transformação de  plantas  com  genes  virais
estruturais e  não  estruturais.  Também  o  sistema  transgênico  é  utilizado  para  estudo  da
função proteíca e replicação do vírus. Atualmente  desenvolvemos  dois  programas  visando
resistência a tospovírus em alface, tomate e outras solanáceas utilizando-se RNAs defectivos
interferentes, genes da proteína do nucleocapsídeo e genes da  proteína  do  movimento  dos
vírus em planta.

        Nosso Grupo de Pesquisa que possue uma grande interação com unidades  da  Embrapa
como o CNPH e CENARGEN, vem desenvolvendo linhas de  pesquisa  em  virologia  vegetal.
Abragem-se as áreas de caracterização de vírus, viróides  e  fitoplasmas,   produção   de   kits
sorológicos e moleculares para detecção destes patógenos e  a  proteção  transgênica contra
infecção de fitoviroses.
        Aproveitando o material humano disponível  e  as  instalações  já  existentes,  reforçados
com os recursos de projetos de pesquisa financiados junto ao CNPq, FAP-DF, EMBRAPA  e
PRONEX,   pretende-se   introduzir,  adaptar  e  também  desenvolver   novas    metodologias,
visando a caracterização de vírus, viróides e fitoplasmas  que  causam  prejuízos  em culturas
economicamente importantes no Centro-Oeste e no Brasil como hortaliças, fruteiras  tropicais
e temperadas e grandes culturas como  milho  e  soja,  através  de  técnicas  imunológicas  ou
moleculares altamente sensíveis e específicas. Após a  completa  caracterização  molecular,  a
meta, a ser alcançada em prazo maior, seria a produção de "kits" de diagnose de fácil  manejo,
sensíveis  e  de  baixo  custo,  que  poderiam  ser   comercializados   por   empresas   privadas,
visando essencialmente atender às nossas necessidades.
        Nossas pesquisas também visam testar o maior  número possível de genótipos de várias
culturas visando a obtenção de  material  resistente  a  estes  fitopatógenos.  A  obtenção  de
resistencia transgênica também é considerada principalmente naquelas culturas onde  não se
encontra genes naturais de resistência a fitoviroses. O treinamento e resultados dos projetos
de  pesquisa  são   divulgados   através   de   discussões   conjuntas,   mini-cursos,  além   de
seminários, cursos regulares de pós-graduação,  demonstrações  práticas,  e  participação em
congresso.

1. Resende, R. de O. 1993. Generation  and  Characterization  of  Mutants  of  Tomato Spotted
       Wilt Virus. Koninklijke Bibliotheek. The Hage, The Netherlands. 114 pp

2. Resende, R. de O., de Haan, P., de  Ávila,  A. C.,  Kitajima,  E. W., Kormelink,  R., Goldbach,
       R.W. & Peters, D. (1991). Generation of envelope and defective interfering  RNA mutants
       of tomato spotted wilt virus  by  mechanical passage. Journal  of  General  Virology  72,
       2375-2383.

3. Resende, R. de O., de Haan, P., van de Vossen, E., de Ávila A.C., Goldbach, R. & Peters, D.
       (1992). Defective interfering (DI) L RNA segments of tomato  spotted  wilt  virus (TSWV)
       retain  both  virus  genome  termini  and  have  extensive  internal  deletions. Journal   of
       General Virology 73, 2509-2516.

4. De Ávila, A.C., de Haan, P., Kormelink,  R.,  Resende,  R.  de  O. ,  Goldbach,  R. W.  Peters,
       Classification of tospoviruses based  on  phylogeny  of  nucleoprotein  gene  sequences.
       Journal of General Virology 74, 153-159.

5. Prins, M.; Resende, R.  de  O.;  Anker,  C.  De  Haan,  P.  &  Goldbach,  R.  1996. Engineered
       RNA-mediated resistance to tomato spotted  wilt  virus  is  sequense  specific. Molecular
       Plant-Microbe Interaction 9:416-418.

6. Resende, R. de O.; Pozzer, L.; Nagata, T.;  Bezerra,  I. C.;  Lima,  M.I.;  Kitajima,  E. W. & De
       Ávila, A.C.1996. New  Tospoviruses  Found  in  Brazil.  Proceedings  of  the International
       Symposium   on   Tospovirus   and   Thrips   of    Floral    and    Vegetable    Crops.    Acta
       Horticulturae. 431: 78-89.